革兰氏染色法需要准备的药品与器材?以及步骤?

信息分类:金相实验仪器专题-技术应用   作者:yiyi发布   时间:2012-4-8 23:42:12 将本页加入收藏

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药品与器材
药品
1. 95%酒精
2.蒸馏水
3.长有Top10 E. coli之液态培养菌液
4. LB agar plates:1% (w/v) Bacto-tryptone, 0.5% Bacto yeast extract, 1%
NaCl,调至pH 7.0后,加入1.5% (w/v) Bacto agar,以湿热法灭菌。

器材
1.接种环
2.三角玻棒
3.酒精灯
4.试管
5.试管架
6.封口蜡膜(parafilm)


实验步骤
(一)细菌之接种方法—分区划线法(Streaking method)
1.每一组取一个LB plate,在培养皿底部标明组别及日期,并写上菌株名
称:如“Top10 E. coli “。

2.将接种环在酒精灯火焰上烧红,环上方部份亦以火焰烧过,将接种环在培养基空白处轻戳以使冷却。 
【注意! 盖子请勿全开或置于实验桌上!
此时接种环请勿放置在桌上或接触到其它东西! 】

3.用右手小指及手掌心将Top10 E. coli之液态培养菌液试管盖子打开
(盖子夹在小指及手掌中),以接种环轻触菌液,使接种环上沾有细菌。

4.打开空白的LB plate,将沾有菌落的接种环于其上轻轻连画数条线后,将培养皿盖子盖回。

5.再次将接种环在酒精灯火烧红并使冷却。 将培养皿旋转约60度,画第二次线。

6.重复上一步骤之操作,画第三次线或第四次线。

7.将接种环在火焰上烧红灭菌后置回实验桌上。

8.使用封口蜡膜将培养皿封好并倒置,于37 ℃培养箱中培养过夜。


出自百科

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